1

Целью исследования являлось сравнительное изучение уровней экспрессии Ki-67 и Циклина D1 в подтипах тройного негативного рака молочной железы (ТНРМЖ) с различным андрогеновым статусом. Исследован операционный материал от 60 пациенток клинической группы 2А, клинической стадии T1-2N0M0, находившихся на лечении в ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» МЗ РФ с 2012 по 2015 г. Во всех случаях операция являлась первым этапом лечения. Для иммуногистохимического исследования были использованы антитела к рецепторам эстрогена, прогестерона, андрогена, цитокератинам 5/6, Ki-67, Циклину D1, белкам HER2/neu и EGFR. Установлено, что в ТН РМЖ с признаками базального эпителия отмечался достоверно более высокий уровень экспрессии Ki-67 по сравнению с остальными ТН РМЖ, однако уровень экспрессии Циклина D1 был не однозначен. В части ТН РМЖ наблюдалась сверхэкспрессия Циклина D1, не имевшая корреляционной связи с уровнем экспрессии Ki-67. Высокий уровень Циклина D1 в базальноподобном ТН РМЖ встречался реже, чем в ТН РМЖ без признаков базального эпителия, однако его среднее значение было достоверно выше. Уровень Ki-67 достоверно не отличался в ТН РМЖ с различным андрогеновым статусом. Гиперэкспрессия Циклина Д1 чаще наблюдалась среди андроген-положительных ТН РМЖ, причем ее среднее значение было достоверно выше по сравнению с андроген-отрицательными.

рецепторы андрогена.

базальноподобный тройной негативный рак молочной железы

тройной негативный рак молочной железы

1. Информационный бюллетень ВОЗ. 2015. – URL: http://www.who.int/ mediacentre/factsheets/fs297/ru/. / Informatsionnyi biulleten" VOZ. 2015. .

2. Тюляндин С.А., Стенина М.Б., Фролова М.А. Тройной негативный рак молочной железы // Практическая онкология. – 2010. – № 11 (4). – C. 247-52.

3. Perou C.M., Sørlie T., Eisen M.B. et al. Molecular portraits of human breast tumors // Nature. - 2000. - Vol. 406. - P. 747-752.

4. Кит О.И., Шатова Ю.С., Франциянц Е.М. и др. Путь к персонифицированной тактике лечения больных раком молочной железы // Вопросы онкологии. – 2017. – Т. 63. - № 5. - С. 719-723.

5. Andre F., Zielinski C. Optimal strategies for metastatic triple negative breast cancer with currently approved agents // Ann. Oncol. – 2013. - Vol. 24 (4). - P. 46-51.

6. Тодоров С.С., Босенко Е.С., Кучкина Л.П. и др. Биологическая гетерогенность тройного негативного рака молочной железы // Евразийский онкологический журнал: мат. IX Съезда онкологов и радиологов стран СНГ и Евразии (Минск, 15-17 июня, 2016 г.). – 2016. – Т. 4. - № 2. - С. 469.

7. Храмцов А.И. Определение базовых прогностических маркеров рака молочной железы с использованием технологии тканевых матриц: дис. … канд. мед. наук. – СПб., 2011. – 123 с.

8. Нефедова Н.А., Данилова Н.В. Клинико-морфологическая характеристика подтипов тройного негативного рака молочной железы // Фундаментальные исследования. – 2013. – № 9-5. – С. 881-885.

9. Шатова Ю.С., Франциянц Е.М., Новикова И.А. и др. Антиандрогенная терапия: новое направление таргетной терапии рака молочной железы // Современные проблемы науки и образования. – 2017. – № 3. - URL: http://www.?id=26392 (дата обращения: 07.03.2018).

10. Крылов А.Ю., Крылов Ю.В., Янченко В.В. Определение андрогеновых рецепторов в клетках тройного негативного рака молочной железы // Иммунопатология, аллергология, инфектология. – 2016. – № 1. - С. 32-36 (Белоруссия).

11. Скворцов В.А., Манихас Г.М. Циклин D1 и его прогностическая значимость в планировании эндокринной терапии у женщин постменопаузального возраста при раке молочной железы // Врач-аспирант. – 2012. – № 1.3 (50). - С. 401-407.

12. Басинский В.А., Савицкий С.Э., Шульга А.В. Прогностическое значение уровня экспрессии циклинов B1 и Д1 при раке яичников // Проблемы здоровья и экологии. - 2009. - С. 57-61.

13. José M. Coco Martin J.M., Balkenende A., Verschoor T. et al. Cyclin D1 overexpression enhances radiation-induced apoptosis and radiosensitivity in a breast tumor cell line // Cancer Res., 1999. – Vol. 59. - № 5. – P. 1134-1140.

14. Тюляндин С.А. Перспективные подходы лекарственной терапии немелкоклеточного рака легкого // Новое в терапии рака легкого (терапия рака легкого начала XXI века) / под ред. Н.И. Переводчиковой. – М., 2003 [Электронный ресурс]. – URL: https://medi.ru/info/11123/ (дата обращения: 07.03.2018).

15. Pestell R.G. New roles of Cyclin D1 // Am. J. Pathol. - 2013. - Vol. 183 (1). - P. 3-9.

Рак молочной железы (РМЖ) занимает первое место в структуре онкопатологии у женщин во всем мире. Ежегодно в мире регистрируется более 1 млн случаев данной патологии, влекущей за собой летальный исход более чем 520 тыс. заболевших пациенток .

Тройной негативный рак молочной железы (ТН РМЖ) составляет от 10 до 20% всех опухолей молочной железы, это агрессивные опухоли, быстро дающие отдаленные метастазы, для них характерен плохой прогноз .

Успехи лечения и прогноза РМЖ напрямую зависят от правильной и своевременной морфологической, иммуногистохимической, молекулярно-генетической диагностики данного заболевания .

Ввиду отсутствия в клетках ТН РМЖ всех трех стандартных мишеней таргетной терапии (эстрогеновых рецепторов (ЭР), прогестероновых рецепторов (ПР) и HER2/neu-рецепторов), на сегодняшний день не существует специализированного лечения для этих опухолей, кроме терапии химиопрепаратами, действующими на все делящиеся клетки .

Наиболее часто выделяемым подтипом является базальноподобный ТН РМЖ, составляющий около 70% ТН РМЖ. В многочисленных работах предлагаются различные маркеры для выявления этого подтипа РМЖ: EGFR, высокомолекулярные базальные цитокератины (CК5/6, CК14, CК17), с-KIT, NGFR, белки р63, ламинил, остеонектин, виментин и ряд других . Однако единый диагностический стандарт пока не разработан.

Высказываются предположения о возможных различиях в тактике лечения подтипов ТН РМЖ. Весьма актуальным является поиск потенциальных мишеней для таргетной терапии подтипов ТН РМЖ путем определения значимых биологических маркеров и перехода к действительно персонифицированному лечению этой категории больных и, соответственно, улучшения его результатов .

Последние годы у исследователей вызывает интерес факт сохранности андрогеновых рецепторов (АР) в РМЖ отрицательных по ЭР и ПР. Обнаружено, что в ТН РМЖ также могут сохраняться АР, однако данные о доле таких опухолей сильно варьируют - от 10 до 43%, также нет однозначного мнения о прогностической значимости этого маркера .

Ki-67 - это ядерный белок, который связан с клеточной пролиферацией и экспрессируется в фазах митотического цикла S, G1, G2, и M, кроме G0. В образцах нормальной ткани молочной железы он также экспрессируется, но на низком уровне (менее 3% клеток). Уровень экспрессии Ki-67 во многом определяет тактику адъювантного лечения больных РМЖ. Для ТН РМЖ характерна гиперэкспрессия маркера пролиферации Ki-67.

Особый интерес представляют биомаркеры, которые участвуют в регуляции клеточного деления. В частности, циклины, ассоциированные с ними циклин-зависимые киназы и циклин-зависимые ингибиторы киназ играют важнейшую роль в развитии клеточного цикла. Наиболее актуальным биомаркером является регулятор клеточного цикла - Циклин D1. Повышенная продукция Циклина D1 способствует инициации клеточного деления. Данные об уровне экспрессии Циклина D1 и его прогностическом значении в РМЖ и других опухолях немногочисленны и противоречивы .

Цель исследования: изучить уровни экспрессии Ki-67 и Циклина D1 в базальноподобном и небазальноподобном ТН РМЖ, в том числе при наличии и отсутствии АР в опухоли.

Материал и методы. Материалом для настоящего исследования послужил операционный материал от 60 пациенток с ТН РМЖ, находившихся на лечении в ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» МЗ РФ с 2012 по 2015 г. Пациентки относились к клинической группе 2А, T1-2N0M0 (по результатам маммографии, УЗИ молочных желез и СКРТ органов грудной клетки, брюшной полости и малого таза). Во всех случаях операция являлась первым этапом лечения. Возраст пациенток колебался от 29 лет до 71 года. Т.к. возраст 40 больных (66,7%) приходился на промежуток от 41 до 60 лет, то средний возраст в группе составил 51,3±3,5 года.

На основании стандартного иммуногистохимического (ИГХ) исследования у всех пациенток был выявлен ТН РМЖ (ER-/PR-/Her2-негативный), и определен уровень Ki-67. Дополнительно определили экспрессию АР и Циклина D1.

Для ИГХ-исследования с парафиновых блоков операционного материала готовили срезы толщиной 3-4 мк и проводили окрашивание в иммуногистостейнере BenchMark ULTRA. В таблице 1 представлена информация об использованных антителах.

Таблица 1

Характеристика использованных антител

	Антитело		Производитель	Разведение	Демаскировка
			Thermo Scientific		Трис буфер PH=8,0-8,5
					Цитратный PH=6
					Трис PH=8,0-8,5
					Трис PH=8,0-8,5
					Трис PH=8,0-8,5
					Трис PH=8,0-8,5
					Трис PH=8,0-8,5

Для характеристики экспрессии Ki-67, АР и Циклина D1 вычисляли долю клеток с окрашенными ядрами в процентах от общего количества опухолевых клеток. Андроген-положительными (АР+) считали опухоли с экспрессией ≥ 10% клеток опухоли, соответственно андроген-отрицательными (АР-) с экспрессией <10% клеток.

Для статистической обработки результатов использовали параметрические методы статистики для показателей вариационного ряда: средняя арифметическая (М), ошибка средней (m), медиана (Me), коэффициент вариации (C.V.). Достоверность разницы между двумя средними определяли по значению t-критерия Стьюдента, корреляционную связь оценивали по коэффициенту корреляции Пирсона (r).

Результаты и обсуждение. На основании результатов ИГХ-исследования с антителами к СК5/6 и EGFR все ТН РМЖ распределились следующим образом: базальные характеристики были выявлены в 37 (61,7%) случаях (БП ТН РМЖ) и отсутствовали в 23 (38,3%), последние мы отнесли к НК ТН РМЖ (табл. 2).

Таблица 2

Уровень экспрессии Ki-67 и Циклина D1 в ТН РМЖ

Примечания: C.V. - коэффициент вариации, Ме - медиана. Разница между показателями, обозначенными символом ● - достоверна (Р≤0,05).

В целом в ТН РМЖ уровень Ki-67 составил 76,4±2,2% (Ме=80, C.V.=20,4). Средний уровень Ki-67 в БП ТН РМЖ был достоверно выше, чем в НК ТН РМЖ - 81,9±3,1% и 70,8±3,1% соответственно (P<0,05). В обеих группах разброс данных по этому показателю был незначительный, на что указывали коэффициенты вариации менее 30 (табл. 2).

Среднее значение уровня экспрессии Циклина D1 в ТН РМЖ составило 35,4±5,1. Разница средних показателей экспрессии Циклина D1 в БП ТН РМЖ и НК ТН РМЖ (38,1±8,1 и 32,8±6,5% соответственно) была не достоверна, также были близки значения медианы (22,5 и 20 соответственно) (табл. 2). Проведенный корреляционный анализ зависимости между уровнями экспрессии Ki-67 и Циклина D1 показал, что коэффициент корреляции имеет значения, близкие к нулю, что указывает на статистически не значимую зависимость этих количественных показателей (табл. 2).

Обращал на себя внимание высокий коэффициент вариации как в целом, так и в обеих группах ТН РМЖ - около 100, что свидетельствовало о большой вариабельности значений уровня экспрессии Циклина (табл. 2). И действительно, в изучаемых ТН РМЖ уровень экспрессии Циклина D1 колебался от 1% до практически 100% окрашенных ядер. Поэтому мы разделили каждую группу еще на 2 подгруппы: с высоким показателем экспрессии Циклина D1 и низким. За пороговое значение Циклина D1 мы приняли 30%, т.к. ранее встречали в работах других авторов подобную градацию . Данные представлены в таблице 3.

Таблица 3

Экспрессия маркеров клеточного цикла в подгруппах ТН РМЖ с высоким и низким уровнем Циклина D1

Группа ТН РМЖ			Уровень экспрессии ИГХ-маркера (М±m, %)
Всего: 60 (100)	Базальноподобный		89,9 ±4,7▲	83,3 ±4,7 ●
			12,2 ±2,8	81,3 ±3,9
		Всего: 37 (100)
	Неклассифицированный		66,5 ±6,6▲	70,1±3,6 ●
			8,6 ±2,7	75 ±4,1
		Всего: 23 (100)

Примечания: C.V. - коэффициент вариации, Ме - медиана. Разница показателей, помеченных одинаковыми символами (▲ или ●), достоверна (Р<0,05).

Высокий уровень Циклина D1 в обеих группах встречался реже, чем низкий: в БП ТН РМЖ он наблюдался в 32,4% наблюдений, в НК ТН РМЖ в 43,5%. Средний уровень экспрессии этого маркера был достоверно выше (Р≤0,05) в БП ТН РМЖ - 89,9±4,7%, против 66,5±6,6% в НК ТН РМЖ (медиана - 92% и 70% соответственно) (табл. 3). Коэффициенты вариации в обоих случаях были меньше 30, что указывало на однородность исследуемых рядов данных.

Экспрессия Ki-67 в БП ТН РМЖ с высоким уровнем Циклина D1 составила в среднем 83,3±4,7%, в НК ТН РМЖ - 70,1±3,6%, медиана 85 и 70% соответственно, разница показателей являлась достоверной (Р<0,05). Низкий показатель коэффициента вариации (<30) также позволил сделать заключение об относительной однородности данных (табл. 3).

Низкий уровень Циклина D1 составил в среднем в БП ТН РМЖ - 12,2±2,8%, а в НК ТН РМЖ - 8,6±2,7%. Разница показателей не являлась достоверной в силу большой вариабельности данных в обеих подгруппах (коэффициент вариации 89,3 и 110,5 соответственно). Средний уровень экспрессии Ki-67 между подгруппами с низким уровнем Циклина D1 также не имел статистически достоверного различия и составил в БП ТН РМЖ - 81,3±3,9%, а в НК ТН РМЖ - 75 ±4,1% (p>0,05).

Т.о., высокая экспрессия Циклина D1 в БП ТН РМЖ встречалась несколько реже, но ее средний уровень был достоверно на 23,4% выше, чем в ТН РМЖ без признаков базального эпителия (p<0,05).

В таблице 4 представлены результаты определения АР в изучаемых ТН РМЖ.

Таблица 4

Экспрессия Ki-67 и Циклина D1 в ТН РМЖ с различным андрогеновым статусом

Примечания: Ме - медиана, C.V. - коэффициент вариации.

АР+ опухоли наблюдались в 11 случаях (18,3%), средний показатель экспрессии АР составил 51,6±3,4%, Ме=71,9%. Можно отметить, что в 5 опухолях экспрессия составила 10-30%, в остальных 6 - от 80-95%. Т.е. при наличии в опухоли экспрессии АР она была либо низкой, либо высокой, средних показателей в диапазоне >30%, но <80% не наблюдалось. Соответственно АР- статус был установлен в 49 опухолях (81,7%). Долевое соотношение ТН РМЖ с признаками базального эпителия и без таковых было практически одинаковым как в АР+, так и в АР- опухолях (табл. 4).

Экспрессия Ki-67 в среднем составила в АР+ опухолях 68,9±6,4% (Ме=70), в АР- - 76±2,7% (Ме=80), различие этих показателей не было статистически достоверно (p>0,05) (табл. 4).

При кажущейся разнице экспрессии Циклина D1 в АР+ опухолях, по сравнению с АР- (51,8±13,7% и 31,6±5,1% соответственно), она также не была статистически достоверной (p>0,05). Высокий коэффициент вариации уровня Циклина D1, независимо от наличия или отсутствия АР в опухолях, указывал на крайнюю неоднородность этого показателя (АР+ - C.V.=74,8; АР- - C.V.=101,6) (табл. 4). В связи с этим также разделили ТН РМЖ с различным андрогеновым статусом на подгруппы с гиперэкспрессией Циклина Д1 и его низким уровнем, данные представлены в таблице 5.

Таблица 5

Экспрессия маркеров клеточного цикла в ТН РМЖ с различным андрогеновым статусом в подгруппах с высоким и низким уровнем Циклина D1

АР-статус		Подгруппа ТН РМЖ по уровню Циклина D1	Уровень экспрессии ИГХ-маркера (М±m, %)
Всего: 60 (100)			91,3 ±4,3▲	71,3 ±4,9
			20,2 ±6,2	66 ±11,7
		Всего: 11 (100)
			72,8 ±5,87▲	73,3±5,1
			9,4 ±1,9	79,04 ±3
		Всего: 49 (100)

Примечания: C.V. - коэффициент вариации, Ме - медиана. Разница показателей, помеченных символом ▲ - достоверна (Р<0,05).

В АР+ ТН РМЖ примерно с равной частотой наблюдались высокий и низкий уровни экспрессии Циклина Д1 (45,5% и 54,5% соответственно). Уровень Ki-67 в этих подгруппах достоверно не отличался. В АР- ТН РМЖ доля опухолей с высокой экспрессией Циклина Д1 была почти в 2 раза меньше, чем опухолей с низкой экспрессией (34,7% против 65,3%).

В среднем в АР+ ТН РМЖ гиперэкспрессия Циклина Д1 была достоверно выше, чем таковая в АР- ТН РМЖ, 91,3% и 72,8% соответственно, Р<0,05 (табл. 5). Уровень Ki-67 достоверно не отличался ни в ТН РМЖ с различным андрогеновым статусом, ни в их подгруппах с высокой или низкой экспрессией Циклина Д1.

Таким образом, в части ТН РМЖ как с признаками базального эпителия, так и в случае их отсутствия была выявлена гиперэкспрессия Циклина D1. Гиперэкспрессия Циклина D1 зарегистрирована в различных опухолях, и большинство авторов исследований делают вывод, что ее роль в онкогенезе негативна. Повышенная экспрессия Циклина D1 в доброкачественных опухолях, может предшествовать их озлокачествлению, а также ассоциирована со снижением общей выживаемости онкобольных . На примере немелкоклеточного рака легкого установлено, что гиперэкспрессия Циклина D1 происходит за счет амплификации или гиперэкспрессии гена PRAД1, кодирующего Циклин D1, а повышенная продукция Циклина D1 способствует инициации клеточного деления . Выявлена роль Циклина D1 в индукции клеточной миграции и инвазии, усилении ангиогенеза . Имеются экспериментальные данные о том, что гиперэкспрессия Циклина D1 повышает индуцированный облучением апоптоз и радиочувствительность линии клеток опухоли молочной железы .

Несмотря на то что в рамках проведенного исследования количество АР+ ТН РМЖ было небольшим, удалось выявить некоторые тенденции. Андрогеновый статус не влиял на уровень пролиферативной активности в ТН РМЖ, а гиперэкспрессия Циклина Д1 наблюдалась в части опухолей как АР+, так и АР-. Уровень высокой экспрессии Циклина Д1 в АР+ ТН РМЖ был в среднем достоверно выше, чем в АР-. Также среди АР+ ТН РМЖ большая доля опухолей имела гиперэкспрессию Циклина Д1. Имеются исследования, в которых показано, что женщины с Циклин D1-негативным, ЭР+ РМЖ имеют лучший прогноз при лечении . Возможно, что применение гормональной терапии в отношении андрогена будет иметь ту же закономерность для АР+ ТН РМЖ.

Заключение

В БП ТН РМЖ наблюдался достоверно более высокий уровень экспрессии общего маркера пролиферации Ki-67 по сравнению с ТН РМЖ, не имевшими признаков базального эпителия.

Различие средних значений Циклина Д1 этих групп не достоверно. Уровень Циклина D1 в обеих группах очень вариабелен и корреляционно не связан с экспрессией Ki-67.

Разделение изучаемых групп ТН РМЖ на подгруппы с высоким и низким уровнем экспрессии Циклина Д1 позволило установить, что в части ТН РМЖ наблюдалась гиперэкспрессия Циклина Д1, являющегося маркером такого важного звена митотического цикла, как S-фаза. Высокий уровень Циклина D1 в БП ТН РМЖ наблюдался реже, чем в небазальноподобных ТН РМЖ, однако его среднее значение в первом случае достоверно выше. При низком же уровне экспрессии Циклина D1 достоверных различий между группами не наблюдалось по причине значительного разброса данных.

При гиперэкспрессии Циклина D1 в опухолях сохранялся достоверно более высокий уровень Ki-67 в БП ТН РМЖ по сравнению с НК ТН РМЖ; при низком же уровне Циклина D1 достоверность различий отсутствовала.

Доля опухолей с высокой экспрессией Циклина Д1 была несколько больше среди АР+ ТН РМЖ, причем ее среднее значение было достоверно выше по сравнению с АР- опухолями.

Библиографическая ссылка

Ващенко Л.Н., Карнаухов Н.С., Гудцкова Т.Н., Кварчия М.В. СОПОСТАВЛЕНИЕ УРОВНЯ ЭКСПРЕССИИ МАРКЕРОВ ПРОЛИФЕРАЦИИ KI-67 И ЦИКЛИНА D1 В ТРОЙНОМ НЕГАТИВНОМ РАКЕ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ С РАЗЛИЧНЫМ АНДРОГЕНОВЫМ СТАТУСОМ // Современные проблемы науки и образования. – 2018. – № 4.;
URL: http://?id=27732 (дата обращения: 01.02.2020).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»

Что такое иммуногистохимическое исследование?

Иммуногистохимическое исследование - особый вид исследования ткани, который предполагает использование специальных реактивов. При гистологическом исследовании материал, полученный при биопсии или после операции, окрашивают с помощью красителей. При иммуногистохимическом исследовании используют специальные реактивы, содержащие антитела, меченные специальными веществами. Антитело - белковое вещество, которое связывается в тканях с определенными участками (если они есть) - антигенами, после чего возникает реакция, по которой и можно судить, присутствует в ткани то или иное вещество или нет.

На чем основано иммуногистохимическое исследование?

Иммуногистохимическое исследование основано на реакции антиген-антитело. Такие реакции каждый день происходят в организме. Например, при попадании чужеродного вещества в организм человека у него образуется в крови антитела, которые связывают чужеродный агент. На основе этой реакции работает вакцинация (сначала в организм вводят антигены - очищенные частицы микробов и организм вырабатывает антитела, а при попадании инфекции эти антитела связывают чужеродные микроорганизмы).

При иммуногистохимическом исследовании используются сыворотки, содержащие антитела, которые связываются с этими факторами, после чего возникает реакция, по которой и можно судить о наличии их в опухоли. Можно привести "бытовой пример" на бумагу нанесен прозрачный клей. При обычном рассмотрении листа он малозаметен, но стоит только присыпать его мелким песком, как становится виден рисунок, за счет прилипающих частиц песка.

Зачем нужно иммуногистохимическое исследование?

В результаты многочисленных исследований ученые обнаружили в опухолях ряд факторов, которые связаны с прогнозом заболевания и ответом на лечение. К таким факторам относятся рецепторы к эстрогенам (ER) , рецепторы к прогестерону (PR) , ki -67 (маркер активности опухоли), her 2 neu (определяет чувствительность опухоли к трастузумабу/герцептину), VEGF (сосудистый фактор роста), Bcl -2, р53 и др.

Все эти факторы могут содержаться в опухоли. Однако при обычном гистологическом исследовании их невозможно определить.

Как проводится иммуногистохимическое исследование?

Иммуногистохимическое исследование проводится в лаборатории. Для его проведения необходима опухолевая ткань, которую обычно получают при биопсии или после операции. Выполняется тонкий срез ткани (обычно она залита в парафин) после чего производится окрашивание с помощью специальных реактивов.

Какой материал используется для иммуногистохимического исследования?

Для иммуногистохимического исследования используется ткань, полученная при биопсии или после операции. При раке молочной железы наиболее часто используется материал биопсии. Очень важно, чтобы материал был получен до начала лечения, в противном случае результаты могут быть искажены.

Какое значение иммуногистохимическое исследование имеет при раке молочной железы?

Иммуногистохимическое исследование в настоящее время имеет одно из кардинальных значений в выборе тактики лечения, выборе самого лечения. Данные исследования помогают врачу подобрать наиболее эффективное лечение и позволяют оценить прогноз заболевания.

Что такое рецепторы к эстрогену и прогестерону?

Рецепторы к эстрогену и прогестерону - это белковые вещества, которые располагаются на поверхности опухолевой клетки. При воздействии на них женских половых гормонов образуется комплекс, который стимулирует опухоль к размножению. Несмотря на то, что гормонотерапия рака молочной железы была открыта задолго до обнаружения этих рецепторов, после их открытия показания к использованию этого метода лечения были существенно уточнены, в связи, с чем эффективность его существенно возросла. А такие препараты как тамоксифен и фарестон (группа антиэстрогенов) воздействует именно на эти рецепторы, блокируя их, не давая опухолевой клетке размножаться. Наличие в опухоли рецепторов к эстрогенам и прогестерону связано с лучшим прогнозом по отношению к опухолям, которые не содержат данные рецепторы.

Что такое her2neu?

Her 2 neu (протоонкоген, кодирующий рецептор 2 человеческого эпидермального фактора роста c - erb В- 2) . Гиперэкспрессия (увеличенное содержание) этого фактора отмечается в 25-30% случаев рака молочной железы и ассоциируется с плохим прогнозом при наличии метастазов опухоли в регионарных лимфоузлах. Данный фактор определяет чувствительность опухоли к трастузумабу (герцептину) - одному из современных и эффективных препаратов в лечении рака молочной железы.

Что такое ki67?

Ki 67 является маркером пролиферации, то есть "определителем скорости деления опухолевой клетки". Данный параметр оценивается в процентах. При ki 67 менее 15% опухоль считается менее агрессивной, при показателе более 30% опухоль считается высоко агрессивной. ki 67 является предсказывающим фактором. Так при высоком уровне данного фактора опухоль с более высокой вероятностью ответит на химиотерапевтическое лечение. При низком уровне данного показателя опухоль в большей мере отреагирует (при наличии позитивных рецепторов к эстрогенам и прогестерону) на гормонотерапию.

Какие другие маркеры используются в диагностике рака молочной железы?

В настоящее время в рутинной практике широко используются определение рецепторов к эстрогенам и прогестерону (ER PR), her 2 neu , ki 67 .

Как разделяют опухоли по подтипам?

Люминальный А - рецепторы к эстрогенам и/или прогестерону положительные, her2neu - негативный, Ki67 менее 14 процентов. Люминальный B (her2neu негативный) - Her2neu негативный, рецепторы к эстрогенам или прогестерона положительные, ki67 - высокий, Люминальный B (her2neu позитивный) - Her2neu позитивный, рецепторы к эстрогенам или прогестерона положительные, ki67 - высокий. erb-B2 сверхэкспрессирующий (her2neu позитивный, рецепторы к эстрогенам и прогестерону отрицательные. Базальноподобный или трижды негативный (рецепторы к эстрогенам и прогестерону - негативные, her2neu - негативный).

Дмитрий Андреевич Красножон, 10 октября 2012 года, последняя редакция 09 декабря 2014 года.

В последние годы наблюдается увеличение численности онкологических заболеваний молочной железы у женщин. Причина такой неутешительной статистики объясняется многими факторами. Прежде чем прописать соответствующую терапию, онкологи назначают тестирование, результаты которого помогают определиться с лечебной методикой. Среди этих тестов и анализов важную роль играет так называемый индекс ки-67.

Что это за показатель, и как ki 67 при раке молочной железы помогает установить индивидуальность прогрессирования патологии и разработать оптимальный план лечения?

Что такое маркер ki-67 и его значение в онкологии

Индекс ki-67 — это особый белок, так сказать антиген злокачественной опухоли, присутствующий в организме человека. Данное вещество формируется исключительно в момент дробления клеток, но если раковые клетки находятся в пассивном состоянии, выявить его невозможно, поэтому он не обнаруживается при обычном гистологическом изучении биоптата. Благодаря такой особенности маркера, медицине под силу спрогнозировать дальнейшее развитие опухолевого процесса.

Исследование РМЖ осуществляется на образцах перерожденных тканей, которые берутся при биопсии либо во время хирургической операции. Последующая обработка мутированного материала осуществляется либо с применением комплексных тестов, позволяющие вывести шкалу активности геномов, либо иммуногистохимического метода.

На сегодняшний день выявление индекса выполняется при диагностировании пациенток, у которых обнаружена карцинома в молочной железе. Однако данный исследовательский метод эффективен не только при раке груди, а и других опухолей в организме человека, однако именно при РМЖ он выполняется чаще, чем в других эпизодах онкологии.

При злокачественной природе опухоли врач рекомендует женщине пройти тестирование для того, чтобы установить влияет ли показатель антигена на формирование опухоли. Помимо этого, назначаются и другие анализы, к примеру, присутствует ли рецептор her2-neu. Исходя из полученных данных, и разрабатывается дальнейшая противоопухолевая терапия. Чем больше клеток занято в синтезе, тем выше уровень онкомаркера.

Показанием для назначения обследования на ки 67 при раке молочной железы является:

1. Если в организме человека присутствует онкология любой локализации.
2. Если имеются подозрения на злокачественный характер опухоли.
3. Если подозревается рост новообразования.
4. Если необходим тщательный контроль над лечебным процессом.
5. Если требуется найти процент .
6. Если требуется определиться с врачебной методикой по отношению к болезни.

Параллельно с этим устанавливается гормональная особенность опухолевого образования, и насколько велик риск формирования вторичных очагов в лимфатической системе и других органах.

Вне зависимости от того, насколько чувствительна опухоль к терапии гормональными препаратами и присутствует либо отсутствует поражение лимфатических узлов молочной железы, при большом показателе ki-67 часто наблюдаются рецидивы, которые снижают шансы на выздоровление. Под рецидивными моментами подразумевается:

• Возврат недуга после лечебного курса.
• Развитие метастаз в отдаленных внутренних органах (легкие, костный аппарат).
• Местный рецидив, то есть, непосредственно в тканях и лимфоузлах груди, или в послеоперационном рубце.

Если при рецидивирующем раке показатель маркера существенно возрос, по сравнению с первичным, это указывает на необходимость применения более агрессивных лечебных методов и их комбинацию.

Для сдачи анализа на реакцию маркера не требуется особого подготовительного периода и специальной обстановки. Специалист делает забор образца поврежденной ткани и выполняет его окрашивание, тем самым устанавливая численность клеток, готовых к синтезу, или находящихся в цикле размножения.

Для того чтобы расшифровать результат, используется специальный тип реактивов, в которых присутствуют отмеченные определенными веществами антитела:

• Оценка итогового результата окрашивания выполняется с использованием световых микроскопов.
• Процентный показатель устанавливается исходя из соотношения окрашенного клеточного материала к остальному, помимо этого степень тональности окрашивания абсолютно никакой роли не играет.
• При осуществлении тестирования точка отсечки индекса на 15% была установлена исходя из опыта патологоанатомов, при этом учитываются рекомендации известных международных онкологических клиник.
• Тестирование выполняется с учетом разделения всей раковой опухоли.

Расшифровка теста выполняется в процентном соотношении:

• Если окрашивание не произошло, то есть, оно нулевое, это означает, что новообразования в организме не имеется. Другими словами, ни одна клетка не достигла стадии пролиферации.
• Если маркер показал 100%, значит, все клетки находятся в пролиферативной стадии, то есть, они в фазе активного деления. В данной ситуации это указывает на стремительное прогрессирование рака.
• Показатель ниже 20% говорит о медленном росте опухоли.
• Если анализ показал больше 20%, это свидетельствует о быстром росте опухоли.

Данный индекс применяется и с целью определения эффективности терапии. Если она прошла удачно, то уровень маркера понижается.

Какая польза от пролиферативного индекса?

Онкомаркер ки-67 отличается высокой способностью в отношении определения делящихся (пролиферативных) клеток. Установив его степень, можно с точностью спрогнозировать показатель выживаемости.

Если его уровень очень высокий, то есть дробящих клеток достаточно много, значит, раковая опухоль будет хорошо поддаваться лечению химией. Дело в том, что препараты, используемые при химиотерапии, воздействуют только на пролиферативные клетки, а в иной ситуации ее применение не даст должного лечебного эффекта.

Однако у каждого высокоточного анализа имеются индивидуальные минусы, не является исключением и маркер ки 67. С одной стороны, высокий индекс указывает на неутешительный прогноз, но эффективность химиотерапии будет высока. С другой стороны, этот тест может и не пригодится при адъювантной химиотерапии.

Нормы, показатели и дальнейший прогноз при онкологии груди

Исходя из показателя ki-67 при онкологии грудной железы, и определяется дальнейшая терапия в отношении болезни. Исходя из того, насколько сильно превышена его норма и определяется дальнейший метод лечения:

1. Химиотерапия.
2. Лучевое облучение.

Учитывая результаты анализов и предполагаемого прогноза, выполняется расшифровка ki 67, исходя из которой, можно сказать, сколько пациентке остается жить:

• Менее 10% — положительный прогноз равен 95%. Если результат в пределах 10-15%, то рубеж в 5 лет благополучен для 85% женщин с карциномой.
• До 15% — считается благоприятным показателем. В данном случае для лечения показан курс гормональными препаратами.
• Результат в 30% — раковые клетки энергично делятся, однако реакция опухоли на химиотерапию будет хорошая. Чем выше показатели ки 67, тем лучше злокачественные клетки поддаются лечению.
• Если результат равный 90%, прогноз считается неутешительным, шанс на выживаемость — нулевой.

Если во время рецидива болезни онкомаркер показывает более высокое значение, чем было при первичной опухоли, значит, вторичная популяция опухоли имеет более агрессивный характер. В данном эпизоде потребуется комбинированная терапия, и скорее намного травматичнее, чем на первой стадии патологии.

С целью исследования вида опухоли, степени ее распространения и локализации, ряда иных характеристик специалисты прибегают к показателям ki-67. Это один из показателей при проведении диагностики, подтверждающий развитие рака молочных желез. Способен указать на активность роста новообразования злокачественные формы.

Ki67 при злокачественном раке молочной железы — это иммунногистохимическое исследование с использованием реактивных специальных антител при проведения теста на наличие антигенов в крови больного, способствующих выработке антител при введении в организм.

Вводится сыворотка с содержанием антител, после чего можно наблюдать реакцию организма на онкогенный фактор, если развитие рака молочных желез в груди у женщин все же имеет место быть. Должна произойти некая реакция, по которой и судят врачи, что протекает онкологический процесс.

Показатели маркера Ki67 указывают на скорость деления патологических клеток, степень развития и прогрессирования опухоли в процентном соотношении и можно спрогнозировать исход, продолжительность жизни для больного. Кроме того по показателям данного онкомаркера врачами назначается оперативное лечение пациенткам по проведению курса химио – гормонотерапии.

Это самый актуальный маркер на сегодняшний день у онкологов, способный выявить потенциал протекания пролиферативной формы злокачественного новообразования. По уровню ki-67 в крови врачи могут спрогнозировать выживаемость при диагностировании рака молочной железы.

Отметка показателя ниже 10% дает шансы на выживаемость 95% онкобольным. При повышении уровня свыше 10% — 85% женщин на протяжении 5 лет жизни. Ki67 при раке груди молочной железы позволяет выявить степень прогрессирования, онкогенности опухоли, также деления клеток.

При приведении в организм данного белка можно предположить тот, либо иной исход диагностируемой стадии развития опухоли. Индикатор сможет определить скорость деления опухолевидных клеток, степени развития новообразования.

Показатели же дадут возможность предположить врачам выбор того или иного лечения после проведения процедуры по удалению опухоли, либо еще до проведения операции. Раковое новообразование растет более усиленно при повышении индексного значения свыше 30%. Это говорит уже о неблагоприятном течение и прогрессировании болезни.

Выживаемость в таких случаях свыше 2-ух лет практически нулевая. При уровне Ki67 менее 15% можно говорить о благоприятном прогнозе и увеличении шансов на полное излечение от рака молочных желез.

Информативное видео

07.02.2019

ВОПРОС: Здравствуйте доктор! В сентябре 2018 поставили диагноз РМЖ 3 ст, по ИГХ: Эстр. 8 б, Прогест 0 б, her отр. KI 75%. Этот анализ делали в а областной больнице. В декабре отдала стекла на пересмотр в г. Обнинск, Калужская обл. все тоже самое, только показатель KI-10%. Подскажите, пожалуйста, может ли быть такая большая разница KI 67 и кому верить? И если прогестерон 0 считается ли эта опухоль более агрессивной, нежели если бы прогестерон был 7 баллов. Спасибо, с уважением Екатерина.

ОТВЕТ: Здравствуйте! В принципе поменялся только КI 67, но насколько я понял это не повлияло на тактику лечения. Этот показатель определяет назначение химиотерапии, а Вам с 3 стадией ее все равно назначили, поэтому сейчас изменение этого показателя неважно! Что касается прогестерона и эстрогена, важно чтобы один хотя бы показатель был высокий, а у Вас это эстроген и это значит, что рак гормонозависимый и у Вас будет антигормональная эндокринотерапия.

26.03.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, о чем говорит эта цифра - ki 67 20%. Это много или мало? Если опухоль гормонозависимая это люминальный А или люминальный В? В интернете ki 67 для люминального А все разные. Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! Это люминальный тип А, так как КI 67 20%, для люминального Типа В ki 67 больше 20 %. Это не много и означает, что опухоль не так агрессивна.

02.04.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, можно ли сделать прогноз риска метастазирования по ki 67 15%? Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! С данным значением считается, что это низкий риск проявления метастазирования, чем выше данный показатель, тем более высок процент прогрессирования заболевания!

03.04.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, нужна ли химиотерапия при ki 67 20%?

ОТВЕТ: Здравствуйте! Вообще нет, но если есть метастазы в лимфоузлы или отек кожи при данном Ki 67,то химиотерапия все равно нужна!

10.04.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, что такое ki 67? Какая должна быть норма и влияет ли это показатель на прогноз?

ОТВЕТ: Ki-67 - это пролиферативный маркер, который является неотъемлемой частью деления клеток в злокачественной ткани. Высокий процент индекса Ki-67 (> 25%) является независимым прогностическим показателем безрецидивной и общей выживаемости, независимо от клинических и гистопатологических особенностей рака.

11.04.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович! Скажите, пожалуйста, если Ki 67 - 7%, HER2/neu-0? T2N1M0, ст.2, 3 ст. зл. Это люминальный В? Может ли быть 3 степень злокачественности при ki 67-7%? Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! Конечно могут быть такие значения ki67 при G3. Если у Вас есть неуверенность и сомнения в этом анализе, то пересмотрите этот результат в независимом онкологическом учреждении, но мне кажется, что в этом нет смысла, так как у Вас есть метастазы в лимфоузлах и Вам все равно рекомендована химиотерапия!

31.05.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, в моей иммуногистохимии есть такой показатель как ki 67. Что означает ki 67 при раке?

ОТВЕТ: Ki-67 - это пролиферативный маркер, который является независимым прогностическим показателем безрецидивной и общей выживаемости, независимо от клинических и гистопатологических особенностей рака. Помимо вклада Ki-67 в прогноз, индекс Ki-67 используется при выборе терапии. Как правило, высокий индекс ki 67 связан с хорошим ответом на химиотерапию, и наоборот, как правило, раковая опухоль с низким ki 67 лучше отвечают на гормонотерапию.

11.06.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, является ли ki 67 25% безусловным показанием для проведения химиотерапии? Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! Да является! И значение этого маркера выше 20% приводит к химиотерапии если нет противопоказаний!

11.06.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, в нашем центре не делают такой анализ как ki67! Стоит ли его сделать самой и на сколько он важен при выборе тактики лечения. Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! Это очень плохо, что его не делают, это очень важный показатель и его надо выполнить, так как от этого маркера зависит дальнейшее лечение! Сделайте его самостоятельно!

15.06.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, здравствуйте! В результате игх написано, что ki 67 не обнаружено! Что это означает? Разве такое бывает? Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! Такого не бывает! Если это РМЖ- то КI 67 должно определяться! Выполните в другом месте! Определить обязательно надо, потому что от этого маркера зависит протокол лечения!

06.07.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович мне делали операцию в июле 2015 года- pT1N0M0. индекс Ki67=25%. Her2\neu-2+ . Вы пишите, что при таких показателях нужно делать химиотерапию, но мне не назначали химию, я принимаю только тамоксифен. Что мне делать? Может сделать самостоятельно снова индекс Ki67 и посмотреть насколько эффективно лечение? Химиотерапию наверно уже поздно.

ОТВЕТ: Здравствуйте! Вы получали лечение в 2015 году, и сейчас вам показан приём только Тамоксифена! КI 67 нет смысла пересматривать и уже прошло 3 года, и это хороший результат! У вас Ki 67 25 % и это немного, но дело в том, что у Вас Her 2 neu ++ и надо было делать fish тест! Сейчас это уже неактуально!

07.07.2018

ВОПРОС: Здравствуйте! Подскажите, пожалуйста,ТНРМЖ,стадия T2aN0M0, ki67-18,какой прогноз рецидивов и необходима ли химиотерапия? Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! При триплнегативном раке всегда показана химиотерапия! Доля рецидивов небольшая, но прогрессии
- отдалённое метастазирование имеет место быть, поэтому необходимо наблюдаться у опытного онколога, чтобы этот процесс контролировать!

20.07.2018

ВОПРОС: Здравствуйте. Виталий Александрович. Маркер ki-67 (биопсия шейного л/узла) , заключение "Реакция положительная (++) на 6% клеток опухоли. Насколько срочно необходима химиотерапия? Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! Вы мне практически ничего не сказали, по этой информации я не могу сказать Вам насколько необходимо быстро Вам получать химиотерапию! Какой у Вас рак? Почему лимфоузел? Проконсультировать Вас могу и чем-то помочь только при предоставлении эпикризов из больницы!

04.08.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, что означает Ki 67 в иммуногистохимическом исследовании? Спасибо.

ОТВЕТ: ki 67 это пролиферативный маркер (разрастание ткани путём размножения клеток делением). Высокий процент индекса Ki-67 (> 25%) является независимым прогностическим показателем безрецидивной и общей выживаемости, независимо от клинических и гистопатологических особенностей рака. Помимо вклада Ki-67 в прогноз, индекс Ki-67 используется при выборе терапии. Как правило, высокий индекс ki 67 связан с хорошим ответом на химиотерапию, и наоборот, как правило, раковая опухоль с низким ki 67 лучше отвечают на гормонотерапию.

07.08.2018

ВОПРОС: Добрый вечер, Виталий Александрович! Если ki 67-15%, а grade 3, возраст 38 лет, стадия 1а, гормонозависимый! Нужна ли химиотерапия? Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! В данном случае 38 лет и G3 это низкодифференцированный рак и это плохо! Поэтому не смотря на люминальный тип А, нужна химиотерапия по схеме хотя бы 4 АС и потом тамоксифен 20 мг!

30.08.2018

ВОПРОС: Здравствуйте! Мне 44г, рак молочной железы Т1N0M0, проведена радикальная мастоэктомия по Пейти, er5%,pr0, her2-отрицательный, ki67-до70%, подскажите пожалуйста мои шансы на жизнь?

ОТВЕТ: Здравствуйте! Вы очень молоды и у Вас вся жизнь впереди. Вам надо пройти правильное лечение, и у Вас будут хорошие шансы на долгую ремиссию.

16.09.2018

ВОПРОС: Здравствуйте Виталий Александрович. Скажите пожалуйста, что имеет большее значение для прогноза выживаемости при тнT1N0M0 ki 67- 63% или grade 2 (2+2+2). Понимаю, что ki это деление клеток, а grade это злокачественность. Деление это рост, а злокачественность распространение? Хотя все наверное связанно, чем больше деление, тем в дальнейшем больше распространение? Протоковая карцинома неспецефического типа с тубулярными структурами. Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! Оба показателя важны, но я считаю что является важнее, но G показатель тоже важен, в вашем случае при Т1 это очень важно. Cтепень злокачественности это G, она состоит из баллов, где оценивается ядро клетки, сама клетка и другие показатели, Ki 67 это скорость деления, как она быстро делится. Чем больше Ki 67, тем скорость деления выше и возможность распространения больше, поэтому такую опухоль надо активно лечить химиотерапией.

04.12.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, что означает низкий индекс ki 67? И это хорошо или плохо?

ОТВЕТ: Низкий пролиферативный индекс ki 67 означает, что опухоль менее агрессивная и это, конечно, хорошо! Вы более подробно почитать об этом в справочнике сайта по этой ссылке

07.12.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, и все же при каком проценте пролиферативного маркера Ki-67 молекулярный подтип опухоли становится люминальным Б?

ОТВЕТ: Здравствуйте! Сегодня пока все ещё считается 20 % , но в ближайшее время думаю уже будет цифра 30! В некоторых ведущих центрах уже считают 30%!

ОТВЕТ: Здравствуйте, шансы у Вас хорошие, не надо мыслить негативно! Вам просто надо пройти правильное лечение! КI 67, конечно, высокий, но это не обозначает, что в 82 % появляются метастазы! Это не так! Врачи онкологи все делают для того, чтобы они не появлялись!

01.02.2019

ВОПРОС: Предполагаемый диагноз на узи - дермоидная киста левого яичника больших размеров. Сделана лопароскопия, материал отправлен на KI-67. локализация: зрелая тератома левого яичника. кусочек левого яичника. Вопрос: если это действительно дермоидная киста или зрелая тератома, каков должен быть результат KI-67, каково должно быть дальнейшее лечение и прогноз? Каким образом подтверждается этот предварительный диагноз? Можно ли говорить о раке яичника?

ОТВЕТ: Здравствуйте! Я вам рекомендую обратиться с этим вопросом к онкогинекологу, так как я занимаюсь лечением рака молочной железы.